■克隆名稱

  rTaq+(10E9/14G9)

■產(chǎn)品說明

  本制品是抗Taq單克隆抗體和TAKARA公司rTaq酶的混合制品，適用于Hot StartPCR高溫加熱前，抗Taq單克隆抗體與Taq酶結(jié)合，抑制聚合酶活性，從而抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特意性擴(kuò)增。抗Taq單克隆抗體在PCR反應(yīng)最初的DNA變性步驟已變性，因此無需特殊失活處理，在常規(guī)PCR反應(yīng)條件下即可使用。使用本試劑擴(kuò)增得到的PCR產(chǎn)物的3’末端附有一個(gè)“A”堿基，可直接用于TA克隆。

■來源

  E.coli 重組蛋白，鼠源抗體。

■活性單位

  2.5U/uL

■品質(zhì)保證

  酶純度檢測＞99％，無核酸內(nèi)切、外切酶活性，也無核酸污染，抗體純度＞95%。

■應(yīng)用范圍

  RT-PCR、Hot Start PCR法擴(kuò)增DNA、對(duì)流PCR。

■PCR性能

  以λDNA為模板可以很好地?cái)U(kuò)增10kb的DNA片段。

  50℃條件下反應(yīng)1小時(shí)，抗體對(duì)聚合酶活性抑制效率達(dá)90%以上

■反應(yīng)緩沖液

  請(qǐng)使用隨酶提供的10×PCR Buffer

■保存條件

  -20 ℃

■PCR體系

  同TAKARA公司商品化酶rTaq。

■PCR條件 

  94℃           5 min

  94℃           30 sec

  Tm             30 sec      25 cycles

  72℃           1kb/min

  72℃           10 min（Gibson組裝用片段擴(kuò)增請(qǐng)去掉此步）

 10℃          hold                                                                                                                    

■備注

  2013年9月份作品，團(tuán)隊(duì)成員精心設(shè)計(jì)篩選出的單克隆抗體，純度高，親和力強(qiáng)于TAKARA公司Anti-Taq抗體2倍，60℃以下抑制效果非常好，請(qǐng)放心使用。